4.实验步骤  

实验共分以下3个主要步骤：  

     1. 质粒转染细胞；2.双报告基因检测；3. 统计学分析。

2. 双报告基因检测  

      (1) 质粒共转染48小时后，弃去培养基，用100μl 1XPBS洗1遍

      (2) 倾斜96孔板，吸干剩余的PBS  

      (3) 去离子水将5XPLB稀释成1XPLB，使用前放到常温  

      (4) 每孔加50μl稀释好的 1X PLB，摇床常温条件下摇15min，进行裂 解  

      (5) 白色不透光的96孔酶标板中每孔加步骤4的上清液10μl， 加入100 μl预先混好的LAR II，2s后测数据   

      (6) 每孔添加100μl预先混好的Stop&Glo Reagent，静止2s后，测数 据  注意：进行Luciferase活性检测时，需在避光条件下进行。

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