胎牛血清是细胞培养常用的添加物,目前享有盛誉的Life等国际品牌的最好胎牛血清价格飞涨,500ML从原来的3000-4000元涨到现在7000-8000元,给很多科研单位或机构造成了巨大的压力,不管是科研单位还是经销商都费劲心机储备高质量的国际进口血清。然而前期储备的较低价格的进口血清总有用完的一天,因此国内相关单位非常关注寻求新型的细胞培养基。 但并不是所有的细胞培养需要最高质量的胎牛血清, 而且市场上有些培养基完全可以替代昂贵的Life等国际品牌血清。
笔者对哺乳细胞培养过程中培养基的选择总结如下心得,以供大家参考:
1) 肿瘤细胞系及悬浮细胞的培养基选择
肿瘤细胞系是最容易饲养的细胞,对胎牛血清要求不高,甚至用新生牛血清就可以了,没有必要用高质量的Life或澳洲胎牛血清。比如,四季青、吉泰、WHB等国产牌子的血清完全可以胜任。对于CHO悬浮细胞,甚至不用添加血清,选择将DMEM作为基本培养基,并添加培养细菌用的有酵母抽提物或植物抽提物就完全可以胜任,超便宜,可以配500 ML不会超过100元。
2) 原代哺乳细胞培养基的选择
对于需要扩增的原代哺乳细胞,比如培养血管内皮细胞,可选择ScienCell的相关培养基也要比用Life的血清要便宜。还有一种选择就是选择佰通生物的AdvCell哺乳细胞快速扩增培养基,这款培养基特异为原代哺乳细胞分离及快速扩增而设计,配有预选的基本培养基以及血清,并添加有一些细胞因子以弥补血清质量差异所造成的影响。这款培养基尤其对于一些扩增速度较慢的原代哺乳细胞非常有效,比如对培养原代成纤维细胞、血管内皮细胞等,效果较好。
在制备转基因小型猪的过程中曾用它来培养增长速度及其慢的猪成纤维细胞时,我们发现若用常规培养基,即使用Life最好的血清也需一个月细胞密度才能达到80%Confluence,而若用AdvCell哺乳细胞快速扩增培养基,1个星期细胞就能达到80% confluence, 而且扩增出来的细胞核型一点问题都没有,因为我们成功地通过核移植获得了转基因小型猪。
总体来讲,国内血清假货很多,在没有优质进口血清的情况下,选择合适的低血清细胞培养基的确是一种较好的选择方案。生产低血清的培养基的厂家国内不是很多,笔者发现ScienCell以及佰通生物AdvCell系列都有4-5%FBS 含量的低血清相关培养基,而且种类也比较多,对需要扩增的细胞基本都能找到相对应的产品。
此文转载来源:丁香通