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细胞划痕实验详解

实验介绍:

细胞划痕实验是一种简单易行的检测细胞运动的方法,检测成本低,可以用来检测贴壁生长肿瘤细胞的侵袭转移能力。


实验内容:

材料:6孔板(其他的也可以,但感觉6孔比较好,大小适中),MARKER笔,直尺,20微升枪头(灭菌),无血清培养基,PBS

步骤:所有能灭菌的器械都要灭菌。MARKER笔,直尺在操作前紫外照射30MIN(超净台内)

1.先用MARKER笔在6孔板背后,用直尺比着,均匀地划横线,大约每隔0.5-1cm一道,横穿过孔,每孔至少穿过5条线。

2. 在空中加入约5*105个细胞,具体数量因细胞不同而不同,掌握为过液能铺满

3. 第二天用枪头比着直尺,尽量垂直于背后的横线划痕,枪头要垂直,不能倾斜

4. 用PBS洗细胞3次,去除划下的细胞,加入无血清培养基。

5.放入37度5%CO2培养箱,培养,按0. 6 .12 24小时取样,拍照。


注意事项:

一般做划痕实验,一般都在无血清或者低血清状态下培养的,否则细胞增殖就不能忽略

按照6孔板背后划线的垂直方向划痕,可以形成若干交叉点,作为固定的监测点,这就解决了前后观察时位置不固定的问题。



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来源:丁香通


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