小鼠腹腔内注射硫代乙醇酸钠，可刺激巨噬细胞的聚集。四日后小鼠腹腔内注入羊红细胞悬液，一小时后解剖收集腹腔吞嗜细胞，染色、镜检可观察对羊红细胞的吞嗜现象。通过计算吞嗜百分比或吞噬指数可测定吞噬细胞的吞嗜功能。

实验方法原理

      吞噬细胞具有对异物(细菌、绵羊红细胞、鸡红细胞等)吞噬和消化的功能，在机体非特异性免疫中发挥重要作用。
      小鼠腹腔内注射硫代乙醇酸钠，可刺激巨噬细胞的聚集。四日后小鼠腹腔内注入羊红细胞悬液，一小时后解剖收集腹腔吞嗜细胞，染色、镜检可观察对羊红细胞的吞嗜现象。通过计算吞嗜百分比或吞噬指数可测定吞噬细胞的吞嗜功能。

实验材料

      ICR小鼠

试剂、试剂盒

      PBS缓冲液   硫代乙醇酸钠   羊红细胞悬液   瑞氏染液   甲醇

仪器、耗材

     解剖器材   注射器   尖吸管   橡皮吸头   试管   载玻片

实验步骤

      1.  实验准备：用无菌注射器吸取3 ％硫代乙醇酸钠3 ml，注射于小鼠腹腔内。

      2.  四日后，注射1 ％羊红细胞悬液1 ml 于小鼠腹腔内。

      3.  注射1 小时后，将小鼠用颈椎脱臼法处死，解剖暴露腹腔，于腹腔靠上部位，用镊子轻轻夹起腹膜，将腹膜剪一小口，用尖吸管注入5 ml 预温的PBS，同时用手反复揉搓腹腔约1—2 分钟，以便尽可能多地冲洗出小鼠腹腔的吞噬细胞。

      4.  用尖吸管吸取腹腔液，置一洁净试管内。

     5.  用尖吸管将腹腔液吹打均匀(尽量避免产生气泡)，吸取一滴滴于载玻片上，加盖玻片镜检。

     6.  观察结果，也可以将腹腔液涂片，平放于湿盘内，37 ℃，孵育30 分钟。取出涂片，用预温的PBS 冲洗3次，然后用甲醇固定1 分钟，以瑞氏染液1 份加pH6.4 的PBS 2 份混匀后，滴于涂片上染色5-10 分钟，以蒸馏水冲洗（切勿先将染液倾去）后，待干，镜检。

注意事项

      3.  用瑞氏染液染色时，切勿先将染液倾去后再冲洗，以免染液中细小颗粒附着于玻片上影响标本的清晰度。

实验结果

      观察小鼠腹腔巨噬细胞和中性粒细胞对羊红细胞的吞噬现象，计算吞噬百分比，即每100 个吞噬细胞中吞噬有羊红细胞的细胞数。也可用吞噬指数表示，即将100 个吞噬细胞中所吞噬羊红细胞的总数除以100，即为吞噬指数。吞噬百分比和吞噬指数一般是平行的。

此文转载来源：丁香通