单克隆抗体上清的制备实验
发布人：管理员 浏览次数： 发布时间：2017-03-08
杂交癯细胞按1：10传代井培养，使细胞过度生长至死亡，然后收获上清并检测滴度，如果滴度很髙，则该杂交瘤可用于大规模实验以进一步纯化或用以制备腹水。
实验材料
试剂、试剂盒
仪器、耗材
实验步骤
1. 将杂文瘤置于一个盛有完全DMEM-10培养基的175 cm2组织培养瓶中，置37 ℃CO2培养箱中，直至生长旺盛适于分传。
2. 按1：10的比例将细胞分传到一个新的175 cm2的培养瓶中，加入完全DMEM-10培养液到总液量为100 ml，并置CO2培养箱中直至细胞过度生长，此时溶液变酸（变黄色），细胞死亡（约5天）。
4. 用ELISA法或用流式细胞仪检测MAb上清的滴度。
5. 将上清无菌保存，在4℃时通常可稳定地存放数周至数月；在-20℃时可存放数月至数年；-70℃时可永久保存。分装成数份冻存，尽量避免反复冻融。
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