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T、B淋巴细胞分离实验

      淋巴细胞主要分T淋巴细胞和B淋巴细胞两大亚群,它们具有不同的特性和功能,为此在进行某些免疫学实验时,首先需分离出纯的T淋巴细胞和B淋巴细胞。


实验方法原理

      淋巴细胞与用溴花二氨基异硫氢化物(简称AET)处理的绵羊红细胞(SRBC)混合后,其中全部T淋巴细胞均能吸附AET—SRBC,形成牢固稳定而巨大的E—花环,较正常未处理的SRBC形成的E—花环百分比为高,而且形成快速,不易脱落,重复性好。再经淋巴细胞分层液分离时,AET—E花环易沉于管底,而未形成E—花环的T淋巴细胞,用低渗液解花环周围的 AET—SRBC,便可获得纯T淋巴细胞,而B淋巴细胞可直接取自分层液的界面。


实验材料

      新鲜豚鼠血


试剂、试剂盒

      Hanks液   小牛血清   199培养液   生理盐水   氯化钠溶液


仪器、耗材

      离心管   离心机


实验步骤

1.  AET—RRBC制备



                       此文转载:丁香通



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