吞噬功能实验
发布人：管理员 浏览次数： 发布时间：2017-03-06
中性粒细胞（polymorphonuclear leukocyte，PMN）的功能包括粘附、移动、吞噬杀菌等，是机体天然免疫力的重要组成部分。
实验材料
试剂、试剂盒
仪器、耗材
实验步骤
一、试管法
肝素抗凝血0.1 ml 滴于小试管底部，再加入等量NBT应用液
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37℃，30分钟（中间摇动一次），再置室温15分钟
37℃，30分钟（中间摇动一次），再置室温15分钟
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摇匀，用毛细管取一滴放于玻片一端，做血涂片
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立即用电吹风吹干，甲醇溶液固定1分钟，10 g/L 沙黄水溶液染色5分钟
立即用电吹风吹干，甲醇溶液固定1分钟，10 g/L 沙黄水溶液染色5分钟
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PBS冲洗、自然干燥、油镜检测
PBS冲洗、自然干燥、油镜检测
二、微量法
取硅油处理的1 mm×75 mm 的毛细管取末梢血至30 mm 处
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立即吹入硅油处理的凹玻片中，与1/30量的0.05%肝素溶液混合
立即吹入硅油处理的凹玻片中，与1/30量的0.05%肝素溶液混合
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加等量的1 g/L NBT，轻轻摇动混合，湿盒内，37℃，室温15分钟
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用毛细管吸去表层上清液，用硅油处理的毛细管吹数次混匀
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吸出少许制成血片，空气干燥，沙黄水溶液染色，油镜观察
三、结果
1. 血片中有10%以上的中性粒细胞的胞质中有蓝紫或蓝黑颗粒沉着，其沉着颗粒形状大小不一，有的呈大块状，有的呈点状或放射状。
NBT配制一定要完全溶解，滤液要呈透明的淡黄色，储存于棕色瓶中，NBT应用液应于用前配制。血涂片要求推出尾部，不可过厚或过薄。血液与NBT要充分混合，保温时间不能过长。
此文转载：丁香通
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