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合成培养基配制实验

      合成培养基是根据研究和了解细胞所需成分基础上配制而成的。目的在于创制出与体内相似的生存环境。合成培养基有固定的组成成分,利于控制实验条件标准化。


实验方法原理

      干粉型培养基是用球磨机或喷雾法将各种培养液成分混合后制成,具有性质稳定、便于贮存和运输、使用方法简便等优点。具有维持细胞生存和代谢需要的效果,与传统方式制备的合成培养基一样好。
      干粉培养基因颗粒极细,
很容易完全溶解于水,配制培养液方法极易掌握,只要按照说明书将规定重量的干粉溶解在一定量的水中即可;或按比例配制,经过消毒灭菌后即使用。


实验材料

      干粉


试剂、试剂盒

      蒸馏水   NaHCO3   HCl   NaOH


仪器、耗材

      滤膜


实验步骤

用干粉制备培养液的过程如下


      1.  制备出去离子水(玻璃三蒸馏水);

      2.  加温水至15—30 ℃;

      3.  把干粉加入水中,搅拌令之溶解;

      4.  加NaHCO3

     5.  加水至最终量;

     6.  必要时用1N HCl 或1N NaOH 调节pH;因滤过的pH 可能受影响;


     7.  用0.22 μm 或小于此微孔滤膜滤过消毒。



注意事项


      1.  不同厂家生产的同种产品其成分比例可能不全相同,配制方法也不同。
      2.  有的培养基需加热或通气
来帮助溶解,此外还应注意有的培养基成分不完全,要求另外加入补充成分。
      3.  如谷氨酰
胺就是时常再单独加入的成分。另外一般都不含NaHCO3 成分,也需配制时自行加入。
      4.  但总的原则是配制过程中要使每一种成分都必须充分溶解和避免出现沉淀。
      5.  所以在配制
培养液时,要按照各种成分的性质、分成若干组分个别溶解,最后按比例和一定顺序混合。
      6.  掌握1—2 种粉剂的配法即可,其它大同小异。



      此文转载:丁香通


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