核糖核酸酶保护实验的基本原理

核糖核酸酶保护实验(Ribonuclease protection assay,RPA)是近十年发展起来的一种全新的mRNA定量分析方法。 其基本原理是将标记的特异RNA探针(32P或生物素)与待测的RNA样品液相杂交,标记

RNA酶保护试验(RPA)

一、RNA酶保护试验(RPA) RNA酶保护试验((RNase Protection Assay,RPA)即糖核酸酶保护实验(Ribonuclease protection assay,RPA)是近十年发展起来的一种全新的mRNA定量分析方法。本文主要介绍

RNA酶A的小鼠细胞治疗

一、RNA酶A的小鼠细胞治疗介绍 RNA酶A透其次是免疫细胞治疗是一种方法,它允许显示的本地化涉及到细胞的蛋白质的RNA酶敏感的结构。这项技术是高度依赖所使用的RNA酶A的质量在我们的

什么是上下游引物

引物(Primer)在聚合作用的起始时,可以刺激合成另一种大分子,并与反应物以共价键形式连接的序列。在核酸化学中,引物是一段短的单链RNA或DNA片段,可结合在核酸链上与之互补的

引物延伸分析(primer extension analysis)

1、引物延伸分析(primer extension analysis) 引物延伸分析用于定量mRNA的量,测定低丰度的mRNA的种类。另外引物延伸实验可标定转录产物的5`-端, 确定转录的精确起始。特异的末端标记的

miRNA命名规则

一、miRNA的定义 miRNA(microRNA)是一组由基因组编码的长度约20~23个核苷酸的非编码RNA,通过和靶基因mRNA碱基配对引导沉默复合体(RISC)降解mRNA或阻碍其翻译。 miRNA(microRNA)在物种进化中相当

抗体的生物素化标记

本法可使抗体或其它蛋白质的ε-氨基通过手臂与酰化的生物素共价结合。其后,生物素化的分子可应用酶标-亲和素或荧光染料-链霉亲和素复合物来检测。小分子的水溶性生物素对细菌

生物素标记蛋白操作方法

下面的操作方法可以使约3~5分子的生物素与1分子的蛋白结合,对某些蛋白来说,生物素与蛋白的分子比可根据不同的生物素化要求进行调整。 1. 溶解2~10 mg 蛋白于1 ml 的BuphTm磷酸盐缓冲

Northern Blot

继分析DNA的Southern杂交方法出现后,1977年Alwine等人提出一种与此相类似的、用于分析细胞总RNA或含poly A尾的RNA样品中特定mRNA分子大小和丰度的分子杂交技术,这就是与Southern相对应而定

NORTHERN BLOT PROTOCOL1

NORTHERN BLOT OF RNA GEL Buffers: 20XSSPE (500 ml): 3.6M NaCl : 105.2 g 0.2M phosphate buffer pH 7.0: 100mL of 1M 20mM EDTA: 20mL of 0.5M Phosphate buffer pH7.0 (500ml): NaH2PO4 (monobasic) 140 mL of 1M Na2H2PO4 (Dibasic) 360 mL of 1M pH to

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