RNA提取心得
一 、组织RNA提取 1. 最好新鲜组织,这样RNA提取的效果比较好,这是肯定的。 2. 如果不是新鲜的(最好在半年之内,-80℃或者液氮中冻存的)组织,注意不要反复冻融,从冰冻状态拿到
RNA的免疫共沉淀分离及检测
非编码RNA的发现使得RNA领域再次成为了生命科学研究关注的焦点。因为RNA是一种不稳定的生物大分子,绝大多数的RNA都需要与特定的RNA结合蛋白质结合形成RNA/蛋白复合物才能稳定存在于
RNA文献大汇总
一、文献 1.Chen, H.H., J. Lebon, and A.D. Riggs, Analysis of RNA structure and RNA-protein interactions in mammalian cells by use of terminal transferase-dependent PCR. Methods Mol Biol, 2008. 488: p. 319-41. 2. Terzi, L.C. and G.G. Sim
RNA免疫沉淀常见问题解答
1. miRNA是什么?具有什么作用? 答:microRNAs(miRNA)是一种内源性非编码小分子RNA,一般具有18到25个核苷酸,其序列在进化上高度保守,通过靶向特定mRNA来调节基因的表达。 miRNA是越来
RNA免疫沉淀常见问题解答
1. miRNA是什么?具有什么作用? 答:microRNAs(miRNA)是一种内源性非编码小分子RNA,一般具有18到25个核苷酸,其序列在进化上高度保守,通过靶向特定mRNA来调节基因的表达。 miRNA是越来
RNA蛋白免疫沉淀技术简介
一、RNA蛋白免疫沉淀技术简介 RIP技术(RNA Binding Protein Immunoprecipitation,RNA结合蛋白免疫沉淀),是研究细胞内RNA与蛋白结合情况的技术,是了解转录后调控网络动态过程的有力工具,能
核糖核酸酶保护测定(二)
1. 加入适当体积的RNA(12 μl)+探头(3 μl)。 尝试5和10μg 的RNA加600或800页高辛标记的探针。 2. 包括2-3的酵母RNA样品/探针使用。 3. 加入20 μl SOLN。 A到所有涡管(FV =30 μl)和自旋向下。
RNA酶保护实验(RNase Protection Assay,RPA)简介
简介: RNA酶保护试验(RNase Protection Assay,RPA)是通过液相杂交的方式,用反义RNA探针与样品杂交,以检测RNA表达的技术。 1. 原理:双链RNA(杂交的)能够抵抗RNA酶的降解。 2. 应用:检测
S1核酸酶保护实验
一、材料准备 4μL5X T4激酶缓冲液 5 μl [γ-32P] ATP(7000次/毫摩尔) 10 μl 水+寡核苷酸(200毫微克) 1 μl T4激酶 1. 37摄氏度1小时 2. 热失活,在75℃下10分钟。 3. 加入1 μl 糖原(20毫克/毫升
核糖核酸酶保护实验相较于Northern的优势与问题分析
核糖核酸酶保护实验(Ribonuclease protection assay,RPA)是近十年发展起来的一种全新的mRNA定量分析方法。其基本原理是将标记的特异RNA探针(32P或生物素)与待测的RNA样品液相杂交,标记