细胞因子水平测定是细胞免疫功能检测的一个重要组成部分。由于许多细胞因子cDNA克隆和表达的成功，给细胞因子单克隆抗体制备、生物学功能的鉴定提供必要条件。
实验方法原理
白细胞介素1是一种重要的细胞因子，主要由单核-巨噬细胞产生，IL-1不仅对多种免疫活性细胞有重要的调节功能，而且与发热、炎症发生以及某些疾病的病理变化有关。目前对IL-1产生水平的检测主要应用生物学活性检测的方法。
小鼠胸腺瘤细胞系EL4的某些亚克隆细胞表面具有高密度IL-1受体，在IL-1诱导下产生高水平的IL-2，通过用IL-2依赖株CTLL-2检测IL-2的生物学活性，从而反映检测样品中IL-1的水平。
试剂、试剂盒
FCS RPMI1640 3H-TdR PPO POPOP 二甲苯
仪器、耗材
滤纸 收集仪 计数仪 96孔板 吸管 滴管 试管 加样器 CO2培养箱
实验步骤
一、ConA刺激小鼠胸腺细胞检测IL-1生物学活性
1. 取6～8 周龄C57BL16小鼠，拉颈处死，无菌取胸腺置不锈钢网筛上，用注射器针蕊研磨成细胞悬液调整细胞数为1.5×107 /ml
（1）从IL-1标准曲线上测得IL-1的活性单位
（2）也可用刺激指数（SI）表示
SI＝────── ×100％
对照组cpm
（1）收集处于对数生长期的EL4细胞
2. 用EL4细胞一步法检测IL-1活性
（1）用5 ％FCS RPMI 1640调整EL4细胞浓度至2×105 /ml，CTTL-2浓度至4×105 /ml
（3）加入不同稀释度的IL-1或待测样品，同时设EL4和CTLL-2细胞对照
（5）收集样品，β计数
一、ConA刺激小鼠胸腺细胞检测IL-1生物学活性
3. ConA促丝裂原作用要进行预试，一般采用亚适剂量。
1. 在一步法检测IL-1时，其EL4细胞浓度不宜超过1×104 /孔，血清终浓度应＜5％。
2. 在二步法检测IL-1时，其EL4细胞浓度在2×105 /孔时，转移上清稀释度不宜低于1∶8，其诱导时间应12～24 小时间为佳。诱导血清浓度应≤1％。
3. 在检测经诱导的上清中IL-1时，应避免使用A23187，TPA和ConA等较强的能诱导EL4细胞产生IL-2的诱导剂来刺激IL-1的产生。
此文转载来源：丁香通
