人α2a，α2b干扰素检测实验
发布人：管理员 浏览次数： 发布时间：2017-03-08
重组人α2a/α2b干扰素生产流程中不可缺少的一环是产品的质量监控，通常采用的是HEp-2/VSV或Wish/VSV系统检测干扰素的生物活性。此系统常由于VSV或细胞的影响而不够稳定，且检测周期较长。
实验方法原理
选用2种针对rHuIFN-α2a和rHuIFN-α2b分子不同表位的McAb，1种McAb作为包被抗体，另1种McAb标记辣根过氧化物酶（HRP）作为结合物，催化底物显色。根据标准品OD值绘制标准曲线，在标准曲线上查出待检标本的含量。
实验材料
试剂、试剂盒
仪器、耗材
实验步骤
1. 向ELISA板中加入稀释好的包被抗体100 μl/孔，4 ℃ 24～48 h
2. 洗3次，加入10倍连续稀释的待测标本（做4个稀释度即可）或倍比稀释的标准品（6个稀释度）100 μl/孔，37 ℃，1 h
3. 洗3次，加入稀释好的酶标抗体100 μl/孔，37 ℃，45 min
4. 洗4次，加入配好的ABTS底物液100 μl/孔，RT，30 min
5. 测410 nm OD
6. 绘标准曲线
注意事项
2. 标本稀释后加入ELISA板时，注意从低浓度向高浓度依次加入。
3. 结合物稀释液和底物缓冲液中禁止加入叠氮钠
此文转载来源：丁香通
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