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蛋白质检测(十四)

凝胶迁移或电泳迁移率实验

实验步骤:

1. 探针的标记

探针为含有与蛋白特异性结合的中心盒,大约20bp

2. 非变性电泳

(1)制备4%非变性胶

(2)制备样品

(3)电泳:预跑胶30-60min100V,上样,跑胶,100V30min左右

3. 转膜:将胶取下,放在大小相似的尼龙膜上,上下各加1层润湿的blotting paper , 放到半干转移装置上,100V380mA , 转膜1H.

4. 紫外交联: 取出膜,在紫外交联仪中交联,999.9mJ,固定10min

5. 洗膜

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