最近做原核表达的几点教训和体会

最近在做原核表达,包涵体。以前也做过,但经验不多。有那么一点失败的教训以及纯化过程中的体会,现在写出来与大家共享,同时希望得到同行们的指正。 1. 首先介绍一下背景。载

细菌的单染技术

简单染色通常只用一种染色剂,使细菌整个细胞染上颜色。但看不清结构。所以只便于检查细菌的形态、大小和排列方式等。 【实验目的】 1、掌握单染色的操作技术 2、观察细菌的基

酵母菌落PCR方法

酵母DNA的提取 1、x新鲜的菌体中加入150ul(200ul)bufferiI25(30)ul蜗牛酶(30mg/ml),37度,10Min(可以30min水浴,中间隔5分钟,振荡一次,避免细胞沉到管底。 2、离心10000rmp,10min,去上清,

病毒包装的实验经验总结

在做病毒包装实验中,有科研工作者常遇到:用同样一个病毒载体系统进行病毒包装实验,为什么有人做的很好,次次成功,有人却是时常做不出来,稳定性很差,不是滴度低就是根本

慢病毒生产方案

一、材料和试剂 1. Hairpin-pLKO.1vector(OpenBiosystems) 2. Packagingvectors:第二代包装质粒包含gag,pol,和rev基因(pCMV-dR8.91或pCMV-dR8.74psPAX2)和包被质粒(pMD2.G)(Addgene) 3. 脂质体2000(Invitrogen)

SPA的提取

SPA提取的方法很多,包括煮沸法、溶菌酶法、葡萄球菌溶素法、超生波法以及三氯醋酸法等。现将常用的方法介绍如下: 1.煮沸提取法 ⑴ 将菌株接种于蛋白胨葡萄糖琼脂培养基上,3

细菌的运动性观察

(一)实验原理 细菌是否具有鞭毛是细菌分类鉴定的重要特征之一。采用鞭毛染色法虽能观察到鞭毛的形态、着生位置和数目,但此法既费时又麻烦。如果仅须了解某菌是否有鞭毛,可

过夜菌液(overnight suspension culture)之培养

仪器用具: 酒精灯 接种环 药品试剂: E. coli 菌株 (JM109) LB 培养液: 1% (w/v) Bacto tryptone, 0.5% Bacto yeast extract, 1% NaCl,以5 N NaOH 调至pH 7.0 后,以湿热法灭菌。 LB agar plates: LB 培养液中

微生物检查中的MPN 法和CFU 法

MPN (most probable number)法即最近似数法,也称为最大可能数法,是食品检验中常用的方法。其生化反应基础为乳糖发酵,革兰阴性菌的无芽胞杆菌,如大肠菌群,一般在37℃、24h 发酵乳

实验室无菌操作

(一)无菌操作前的准备工作 培养材料接种时的无菌操作过程除上述各项消毒灭菌操作外,还需完成以下无菌操作步骤,从而获得接种的无菌培养材料。 工作人员无菌操作前需用肥皂刷洗

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